Estreptolisina O liofilizada

Objetivo:

 En esta práctica vamos a emplear la técnica de la estreptolisina el cual tiene carácter inmunogénico de la SLO que permite valorar la extensión de una infección estreptocócica. La Estreptolisina O (SLO) liofilizada, que es un purificado procedente del cultivo de Estreptococos β-hemolíticos . Se trata de un producto estandarizado para la determinación cuantitativa del título de antiestreptolisina O, por la técnica de inhibición de la hemólisis. Donde, la presencia de un aglutinado indica que no hay cantidad suficiente de anticuerpos por lo que la formación de un precipitado indica la presencia de anticuerpos, que impiden la hemólisis de los glóbulos rojos al unirse el anticuerpo con el antígeno.

Materiales:

- Estreptolisina O liofilizada

- Tampón fosfato pH 6,5

- Suero

- Agua destilada

- Hematíes grupo O (suspensión al 3%)

- Placa de microtiter en U

- Pipetas automáticas y puntas

Procedimiento:

-1: Primero tenemos que rehidratar con agua destilada el vial de estreptolisina liofilizada, mezclándolo suavemente

-2: Ahora vamos a preparar las siguientes diluciones del suero del paciente:

0,2 ml suero + 1,8 ml tampón (1:10) 0,1 ml suero + 2,4 ml tampón (1:25)

-3: A continuación realizamos los siguientes pasos:

     3.1. Dispensamos 50 μL de tampón en cada pocillo de dos filas de la placa.

     3.2. Añadimos 50 μL de la dilución 1:10 al primer pocillo de la fila A.

     3.3. Añadimos 50 μL de la dilución 1:25 al primer pocillo de la fila B.

     3.4. A partir del primer pocillo efectuamos sucesivas diluciones con la ayuda de una pipeta, por pases de 50 μL.

     3.5. Añadir 25 μL de disolución de estreptolisina O rehidratada a todos los pocillos excepto en el último (nº 10) de la fila B.

     3.6. Agitamos suavemente e incubamos 15 min/37º C.

     3.7. Añadimos 25 μL de suspensión de hematíes al 3% a cada pocillo.

     3.8. Agitamos suavemente e incubamos 45 min/37º C, agitando después de los primeros 15 min.

     3.9. Dejar sedimentar durante unos 50-60 min a temperatura ambiente.

Resultado:

 Tras haber realizado estos procedimientos, vemos que hemos hecho correctamente todos los pasos y que hemos logrado ser meticulosos. Pese a algunas dificultades que se nos presentaron; pero pudimos solventarlas y rehacerla bien

 Galería: